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血細(xì)胞分析儀的發(fā)展已經(jīng)有60年的歷史,*初血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀僅能計(jì)數(shù)紅細(xì)胞(RED)和白細(xì)胞(WBC),現(xiàn)在的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀可以測(cè)量血紅蛋白(HBG),血小板(PLT),紅細(xì)胞壓積(HCT),平均紅細(xì)胞體積(MCV)等參數(shù)。不同的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的原理也不同,血細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法有:電阻抗脈沖法(簡(jiǎn)稱電阻抗法)、光電計(jì)數(shù)法和激光計(jì)數(shù)法。經(jīng)實(shí)踐比較,電阻抗法簡(jiǎn)單實(shí)用,被普遍采用。
電阻抗法原理
血細(xì)胞是電的不良導(dǎo)體,將血細(xì)胞置于電解液中,由于細(xì)胞很小,一般不會(huì)影響電解液的導(dǎo)通程度。但是,如果構(gòu)成電路的某一小段電解液截面很小,其尺度可與細(xì)胞直徑相比擬,那么當(dāng)有細(xì)胞浮游到此時(shí),將明顯*大整段電解液的等效電阻。如果該電解液外接恒流源(不論負(fù)載阻值如何改變,均提供恒定不變的電流)則此時(shí)電解液中兩*間的電壓是*大的,產(chǎn)生的電壓脈沖信號(hào)與血細(xì)胞的電阻率成正比。如果控制定量溶有血細(xì)胞的電解溶液,使其從小截面通過(guò),即使血細(xì)胞順序通過(guò)小截面,則可得到一連串脈沖,對(duì)這些脈沖計(jì)數(shù),就可求得血細(xì)胞數(shù)量。由于各種血細(xì)胞直徑不同,所以其電阻率也不同,所測(cè)得的脈沖幅度也不同,根據(jù)這一特點(diǎn)就可以對(duì)各種血細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。這就是變阻脈沖法原理。由于電阻型血液細(xì)胞分析儀操作簡(jiǎn)便、快速、分析參數(shù)較多、價(jià)格便宜,已在國(guó)內(nèi)普遍使用。
光電計(jì)數(shù)法原理
當(dāng)光線通過(guò)血液時(shí),由于細(xì)胞的散射及吸收作用使光線的穿過(guò)量降低,在一定的范圍內(nèi),血細(xì)胞濃度與透光度成反比,與光密度成正比,而光密度或透光度可以由光電池*確測(cè)出。因此,可用一系列已知血液測(cè)定光密度沒(méi)做出光密度-細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)曲線。然后,以樣品液所測(cè)得的光密度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出對(duì)應(yīng)的細(xì)胞數(shù)。
激光法血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理
血液按一定比例稀釋后形成一個(gè)*細(xì)的液流穿過(guò)激光束,每個(gè)血細(xì)胞被激光照射后產(chǎn)生光散射并被光電倍增管接收。細(xì)胞的前向角散射與細(xì)胞的體積大小有關(guān)、側(cè)向角(或高角)散射與細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)、顆粒性質(zhì)等有關(guān),細(xì)胞數(shù)量則與細(xì)胞通過(guò)激光束時(shí)光散射的脈沖次數(shù)相同。各種檢測(cè)信號(hào)被放大、甄別后經(jīng)計(jì)算機(jī)處理可得到各種血細(xì)胞的數(shù)量和體積大小的平均數(shù)、變異系數(shù)、占全血體積的百分比及體積大小分布直方圖等.血紅蛋白測(cè)定同電阻型儀器.白細(xì)胞可分為三類細(xì)胞。激光型比電阻型儀器穩(wěn)定,不易受外電場(chǎng)的干擾,但激光管壽命有限。